基于多重PCR的副溶血弧菌大流行菌群及其毒力基因检测方法的建立与评价

• 作者: 侯凤伶 关文英 史红 张淑红 申志新 申玉学 韩艳青
• 来源期刊: 疾病监测
• 学科: 医学
• 关键词: 副溶血弧菌 大流行菌群 耐热直接溶血素 耐热直接溶血素相关溶血素 群特异PCR 多重PCR
• 年，卷（期）: 2016,（9）
• 所属期刊栏目: 新技术与方法
• 页码范围: 750-754
• 分类号: R378.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3784/j.issn.1003-9961.2016.09.010

摘要

目的 基于多重聚合酶链反应(PCR)建立一种快速方便的检测副溶血弧菌“大流行菌群”及其毒力基因的方法.方法 结合副溶血弧菌“大流行菌群”的群特异鉴定方法GS-PCR,与副溶血弧菌致病相关的耐热直接溶血素基因(tdh)和耐热直接溶血素相关溶血素基因(trh)序列设计引物,建立并优化多重PCR检测方法.用已知的大流行菌株和非大流行临床分离株,对其进行特异性、灵敏度等性能的评价.并对224株食品分离株和3株临床分离株副溶血弧菌进行了再鉴定.结果 副溶血弧菌“大流行菌群”有群特异PCR标识基因和tdh扩增条带.而其他细菌扩增结果呈阴性.检测灵敏度可达到105 CFU/ml.对实验室保存的224株食品分离株和3株临床分离株进行再鉴定表明,其中5株为副溶血弧菌“大流行菌群”,其中3株为tdh阳性、trh阴性,2株tdh、trh均阴性.结论 本研究所建立的多重PCR方法特异性好、灵敏度高.为副溶血弧菌“大流行菌群”及其毒力基因的快速大规模检测提供良好的技术支持.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	关文英		32	263	10.0	15.0
2	侯凤伶		24	257	10.0	15.0
3	申志新		36	316	11.0	16.0
4	张淑红		33	316	11.0	17.0
5	申玉学		9	84	5.0	9.0
6	韩艳青		10	128	5.0	10.0
7	史红		2	5	2.0	2.0