副溶血弧菌主要毒力因子三重荧光定量PCR检测方法的建立与应用

• 作者: 万莹 凌娇 孙卫东 王权 蒋蔚
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 副溶血弧菌 toxR tdh trh 三重荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 60-66
• 页数: 7页
• 分类号: S855.1
• 语种: 中文

摘要

为建立快捷、准确、高效检测副溶血弧菌的方法,以副溶血弧菌种属特异性基因toxR和毒力因子tdh、trh基因序列,分别设计3对特异性引物及相应TaqMan探针,并在toxR、tdh和trh基因的3个探针的5’端分别标记FAM、HEX、CY5荧光报告基团,3’端标记BHQ1淬灭荧光基团,通过优化反应体系和反应参数,确定最佳反应体系,建立一种基于TaqMan探针定量检测副溶血弧菌的三重荧光定量PCR方法.结果:本试验所建立三重荧光定量PCR方法与其他菌株无交叉反应,其最低检出限达到了10 CFU/mL,重复性试验中每组变异系数均小于1％;检测人工染菌的虾肉和贝类样品时,最低检出限亦达到10 CFU/mL,且整个检测扩增时间大约为1h.结果表明,本研究建立的三重荧光PCR检测方法,特异性强、敏感性高、重复性好且耗时短,是高通量检测致病性副溶血弧菌的有效手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王权	中国农业科学院上海兽医研究所	65	346	11.0	15.0
2	孙卫东	南京农业大学动物医学院	79	493	12.0	17.0
3	蒋蔚	中国农业科学院上海兽医研究所	25	104	6.0	9.0
4	万莹	南京农业大学动物医学院	4	6	2.0	2.0
8	凌娇	南京农业大学动物医学院	5	7	2.0	2.0