Taqman-探针荧光定量PCR鉴定副溶血弧菌方法的建立

• 作者: 侯兵兵 刘新萍 李娜 董优优 赵强元 陈昌国 陈秋圆
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Taqman-探针 荧光定量PCR 副溶血弧菌 toxR基因
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 40-43
• 页数: 4页
• 分类号: R503|R378.3
• 字数: 2949字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2018.01.010

摘要

目的 建立一种Taqman荧光定量PCR鉴定副溶血弧菌的方法.方法 以副溶血弧菌标准株(ATCC-VPJS421)和其它常见致病菌标准株为研究对象,通过Gene Bank获取toxR基因的序列,采用生物信息学软件设计特异性PCR引物及Taqman探针,在SLAN 96P荧光定量PCR仪进行扩增检测,评价该检测方法的特异度和灵敏度.结果 ①设计的引物能够扩增出特异性条带;②扩增体系中0.5 μl探针的扩增效果优于1.0μl探针;③Taqman-探针荧光定量PCR检测方法对副溶血弧菌toxR基因的检测灵敏度为10-1 mg/L;④在检测粪肠球菌、金黄色葡萄球菌、腐生葡萄球菌、霍氏肠杆菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、溶藻弧菌、创伤弧菌、梅氏弧菌和弗尼斯弧菌等10种常见致病菌时未出现阳性扩增,特异度为100％.结论 成功建立Taqman探针荧光定量PCR鉴定副溶血弧菌的方法,该方法特异度、灵敏度均较好,适用于副溶血弧菌的快速检测,具有良好的应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李娜	中国人民解放军海军总医院检验科	218	722	14.0	20.0
2	陈昌国	中国人民解放军海军总医院检验科	12	39	4.0	5.0
3	赵强元	中国人民解放军海军总医院检验科	24	69	4.0	6.0
4	侯兵兵	中国人民解放军海军总医院检验科	2	6	2.0	2.0
5	陈秋圆	中国人民解放军海军总医院检验科	4	8	2.0	2.0
6	刘新萍	中国人民解放军海军总医院检验科	1	2	1.0	1.0
7	董优优	中国人民解放军海军总医院检验科	1	2	1.0	1.0