多通道Taqman-探针荧光定量PCR鉴定MRSA方法的建立

• 作者: 刘敏 李艳君 赵强元 郝秀红 郭建巍 陈昌国 陈秋圆 马志家
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: Taqman-探针 荧光定量PCR 耐甲氧西里金黄色葡萄球菌 基因 联合检测
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 22-25
• 页数: 4页
• 分类号: Q503
• 字数: 2784字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2016.03.007

摘要

目的建立基于mec A／nuc／fem B三基因联合的 Taqman-探针荧光定量 PCR鉴定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的方法。方法以常规检验标本中分离和采用 VITEK 2 Compact微生物分析仪鉴定为凝固酶阳性的 MRSA为研究对象，通过PrimerPremier5.0和Beacon Designer 7软件设计针对mec A／nuc／fem B特异性PCR引物及Taqman荧光探针，荧光探针5’端分别采用 FAM，HEX及 ROX标记，3’端采用BHQ1标记，在荧光定量PCR仪进行检测。结果①1 g／dl凝胶电泳结果显示mec A／nuc／fem B三个基因引物特异性较好，扩增出的条带分子量与预期分子量一致且未见非特异性扩增；②在单管单通道及单管多通道的 PCR检测中 mec A／nuc／fem B均获得特异性扩增，且三个基因在单管多通道的PCR扩增效果与单管单通道的相类似。结论成功建立了多通道 Taqman-探针荧光定量 PCR鉴定 MRSA的方法， mec A／nuc／fem B三种基因联合检测可有效区分凝固酶阴性和阳性的 MRSA，提高鉴定 MRSA的准确率。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘敏	中国人民解放军海军总医院检验科	120	627	13.0	22.0
2	陈昌国	中国人民解放军海军总医院检验科	12	39	4.0	5.0
3	李艳君	中国人民解放军海军总医院检验科	15	39	3.0	6.0
4	郝秀红	中国人民解放军海军总医院检验科	8	38	3.0	6.0
5	郭建巍	中国人民解放军海军总医院检验科	15	35	4.0	5.0
6	马志家	中国人民解放军海军总医院检验科	4	9	2.0	3.0
7	陈秋圆	中国人民解放军海军总医院检验科	4	8	2.0	2.0