淫羊藿次苷Ⅱ通过miR-155/eNOS改善人阴茎海绵体血管内皮细胞功能的研究

• 作者: 关瑞礼 李辉喜 杨璧铖 王林 辛钟成 郭应禄 雷洪恩
• 来源期刊: 中华临床医师杂志（电子版）
• 关键词: 勃起功能障碍 淫羊藿次苷Ⅱ miR-155 一氧化氮合酶 内皮细胞功能障碍?
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 页码范围: 826-832
• 页数: 7页
• 字数: 6035字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.1674-0785.2016.06.017

摘要

目的：探讨淫羊藿次苷Ⅱ（ICAⅡ）通过miR-155/内皮型一氧化氮合酶（eNOS）通路改善糖尿病性人阴茎海绵体血管内皮细胞（HCECs）功能障碍的作用机制。方法经原代分离培养HCECs，随机分为三组：正常＋BSA对照组（NC组），Age-BSA联合高糖糖尿病组（DM组）， ICAⅡ治疗组（DM＋ICAⅡ组，ICAⅡ0.1、1、10μmol/L）。Western blot检测eNOS、晚期糖基化终产物受体（RAGE）蛋白的表达；实时定量 PCR 检测 eNOS 及其潜在上游 miRNAs（miR-155、miR-543、miR-31、miR-429、miR-200c、miR-200b）的表达；DAF-FM DA荧光探针法和硝酸盐/亚硝酸盐还原法检测细胞一氧化氮含量；进一步 miR-155过表达慢病毒感染，观察 ICAⅡ对 HCECs中miR-155、eNOS和一氧化氮表达的影响。结果 Age-BSA联合高糖刺激下，HCECs中eNOS和RAGE蛋白表达水平分别显著下调和上调；而不同浓度的ICAⅡ可逆转eNOS和RAGE蛋白的表达（P＜0.05）；且随着ICAⅡ浓度的提高其作用逐渐增强。当HCECs发生糖尿病性功能障碍时，可调控eNOS表达的潜在上游miRNAs中miR-155的表达变化最为明显（P＜0.05）。且在ICAⅡ干预下，发现糖尿病性功能障碍HCECs中eNOS和一氧化氮的表达恢复上调与miR-155表达受到抑制有关。进一步利用miR-155过表达慢病毒感染HCECs后，发现miR-155表达显著升高，而ICAⅡ可明显抑制其表达（P＜0.05）；相应地，HCECs过表达miR-155后，观察到其下游eNOS及一氧化氮表达明显降低，而 ICAⅡ干预可显著恢复其表达（P＜0.05）。结论 miR-155/eNOS 通路可能在糖尿病性HCECs功能障碍的发生中发挥重要作用，而ICAⅡ可能通过调控miR-155/eNOS信号通路而发挥改善糖尿病性内皮细胞功能的作用。