叔丁基过氧化氢诱导人正常肝细胞系L02自噬模型的建立及其线粒体应激机制

• 作者: 师腾瑞 李鸽 海春旭 秦绪军
• 来源期刊: 癌变·畸变·突变
• 学科: 医学
• 关键词: 叔丁基过氧化氢 自噬 线粒体 活性氧 p38/MAPK
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 91-96
• 页数: 6页
• 分类号: R114|R992
• 字数: 3774字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-616x.2016.02.002

摘要

目的:建立叔丁基过氧化氧(t-BHP)诱导的人正常肝细胞系L02自噬模型并探讨其中的线粒体应激机制.方法:体外培养L02细胞,用不同浓度(100、200、400、800、1000μmol/L)t-BHP及线粒体靶向抗氧化剂MitoQ或p38/MAPK特异性抑制剂SB203580进行处理,采用免疫荧光和Western blot检测自噬标志蛋白LC3-Ⅱ和p62蛋白水平,以及p38/MAPK信号通路的激活情况;Mito-SOXRed染色流式法检测细胞线粒体活性氧(ROS)水平.结果:免疫荧光结果显示t-BHP剂量≥800 μmol/L时可明显诱导L02细胞内LC3-Ⅱ发生聚集.Western blot结果显示,与对照组比较,800和1 000 μmol/L t-BHP处理可显著增加LC3-Ⅱ蛋白水平,并降低p62蛋白水平(P均＜0.05).同时线粒体ROS水平在≥400 μmol/L t-BHP处理后明显升高,在1000μmol/L t-BHP处理后p38蛋白磷酸化水平显著增加(P均＜0.05).给予线粒体靶向抗氧化剂MitoQ或p38/MAPK特异性抑制剂SB203580预处理后可有效拮抗t-BHP(1000μmol/L)处理引起的LC3-Ⅱ和p62蛋白水平改变.结论:我们成功建立了t-BHP诱导体外培养人正常肝细胞系L02的自噬模型,证明线粒体ROS介导了此过程的发生,同时p38/MAPK通路在此过程中发挥了重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	海春旭	第四军医大学预防医学院毒理学教研室	154	1028	15.0	22.0
3	师腾瑞	第四军医大学预防医学院毒理学教研室	2	24	2.0	2.0
7	李鸽	第四军医大学预防医学院营养与食品卫生学教研室	1	2	1.0	1.0