猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光定量PCR检测方法的建立

• 作者: 于红欣 单晶晶 周双海 王立娇 陈天慧
• 来源期刊: 北京农学院学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 SYBR Green Ⅰ 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医
• 页码范围: 60-63
• 页数: 4页
• 分类号: S852.659.2
• 字数: 3027字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13473/j.cnki.issn.1002-3186.2015.0211

摘要

[目的]建立一种定量检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的荧光定量PCR方法.[方法]用RT-PCR方法扩增PRRSV的N基因片段,构建含有N基因片段的重组质粒,以不同浓度的PRRSV-N基因重组质粒作为模板来进行检测PRRSV的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR扩增.[结果]PRRSV SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR的扩增效率为98.2％,标准曲线的决定系数为0.9995,可准确检测的最低核酸模板浓度为60 copies/μL,重复性试验的变异系数小于3％,对3种常见的猪源RNA病毒的检测结果全为阴性.临床检测显示,PRRS病猪的血清中PRRSV载量极显著(P＜0.01)高于PRRSV亚临床感染猪.[结论]建立了一种可用于PRRSV定量检测与PRRS早期快速诊断的特异性强、灵敏度高、重复性好的PRRSV SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周双海	北京农学院动物科学技术学院	59	192	8.0	10.0
2	于红欣	北京农学院动物科学技术学院	15	38	3.0	6.0
3	王立娇	北京农学院动物科学技术学院	4	13	2.0	3.0
5	陈天慧	北京农学院动物科学技术学院	3	13	2.0	3.0
7	单晶晶	北京农学院动物科学技术学院	7	34	4.0	5.0