survivin 启动子调控肿瘤干细胞标记 CD133基因 siRNA增殖型溶瘤腺病毒的构建及对肝癌细胞生长的抑制作用

• 作者: 刘斌 朱志军 牛坚 王人颢 王月 申海莲
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 肝癌 干细胞 CD133 细胞增殖 基因表达
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 926-929,930
• 页数: 5页
• 分类号: R349.5
• 字数: 3249字
• 语种: 中文

摘要

目的：构建 survivin 启动子调控的靶向 CD133基因的 siRNA 增殖型溶瘤腺病毒，研究其对肝癌细胞生长的影响。方法RT－PCR 法扩增 survivin 启动子，测序鉴定，双酶切连接，获得 pH－XC2－survivin。酶切 pH－XC2－survivin、pZD55－CD133－siRNA 获得 survivin 启动子表达框的亚克隆和CD133－siRNA 基因表达框的亚克隆，连接获得 survivin 启动子调控的 siRNA 增殖型溶瘤腺病毒表达载体质粒 pT－ZD55－CD133－siRNA。增殖型溶瘤腺病毒 survivin－T－ZD55－CD133－siRNA 经 PCR 和测序鉴定。 qRT－PCR 法检测 CD133表达， Western blot 法检测 E1A，CCK－8法检测细胞生长，流式细胞术检测细胞凋亡。结果成功构建增殖型溶瘤腺病毒 sur－vivin－T－ZD55－CD133－siRNA。 qRT－PCR 法检测 CD133 mRNA明显下降， Western blot 证实 survivin－T－ZD55－CD133－siRNA在肿瘤细胞中表达 E1A 能抑制肝癌细胞 CD133表达及生长。结论构建的增殖型溶瘤腺病毒可有效降低肝癌细胞CD133的表达，用于肝癌基因治疗的进一步研究。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘斌	徐州医学院附属医院肝脏病研究中心	85	312	8.0	12.0
2	王人颢	徐州医学院附属医院肝脏病研究中心	22	46	4.0	5.0
3	牛坚	徐州医学院附属医院肝脏病研究中心	48	241	8.0	12.0
4	王月	徐州医学院附属医院肝脏病研究中心	12	36	4.0	5.0
5	朱志军	北京友谊医院肝胆外科	10	37	4.0	5.0
6	申海莲	上海交通大学附属同济医院干细胞研究中心	4	7	2.0	2.0