hTERT启动子调控的TRAIL基因表达载体的构建及其对肝癌细胞增殖的抑制作用

• 作者: 刘扬 吴嘉慧 李娟 李金华 王宏芳 王志成 龚守良
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体 hTERT启动子 肿瘤靶向治疗 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 825-831
• 分类号: Q78|R735.7
• 语种: 中文

摘要

目的:构建hTERT启动子调控的肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)基因表达载体,探讨其对肝癌细胞SMMC7721和肝细胞HL7702增殖的抑制作用.方法:采用分子生物学方法构建重组质粒pshuttle-TRAIL和pshuttle-hTERT-TRAIL,经PCR和酶切鉴定正确后,通过脂质体转染SMMC7721和HL7702细胞,同时转染pcDNA3.1+-GFP并用荧光显微镜检测转染效率.MTT法检测重组质粒对细胞增殖变化的影响.结果:成功构建重组质粒pshuttle-TRAIL和pshuttle-hTERT-TRAIL,荧光显微镜检测结果显示:质粒与脂质体的比例为1∶3时细胞转染效率最高.pshuttle-hTERT-TRAIL组SMMC7721细胞增殖抑制率从16 h开始明显增加,与对照组比较差异有显著性(P<0.001),且从24 h开始与pshuttle-TRAIL组比较细胞增殖抑制率明显增加(P<0.05);但重组质粒对HL7702细胞增殖抑制率无影响.结论: hTERT启动子调控的TRAIL可明显抑制肝癌细胞的增殖,而对人肝细胞的增殖无影响,其作用效果明显优于TRAIL单基因治疗.