狂犬病病毒G蛋白昆虫细胞表达及其生物信息学分析

• 作者: 夏志平 孙钰 李志萍 王园园 董晓琳 靳朝
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 狂犬病病毒G蛋白 杆状病毒表达系统 生物信息学分析 SRV9株
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 页码范围: 228-234
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文
• DOI: 10.13327/j.jjlau.2016.3009

摘要

利用RT-PCR方法从SRV9株细胞毒基因组RNA扩增G蛋白基因,然后将其克隆到pMD18-T载体上,将得到的重组克隆质粒SRV9G-pMD18T进行PCR和测序鉴定.结果表明:克隆的基因全长为1 609 bp,阅读框正确;将此SRV9株G基因亚克隆到供体质粒pFastBacDual后获得了重组供体质粒SRV9G-pFastBacD-ual;进而将重组供体质粒转化DH10Bac感受态细胞,经2次抗性、蓝白斑筛选及PCR分析后,获得重组穿梭质粒SRV9G-Bacmid;将其转染Sf9细胞48 h后,通过细胞形态学和重组杆状病毒负染电镜观察显示,杆状病毒转染成功;通过Western blot检测显示,Sf9细胞成功表达了SRV9 G蛋白.随后,利用ExPASy服务器上的在线分析工具和生物信息学分析软件DNAStar对G蛋白的基本性质进行了分析.试验采用昆虫细胞Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,成功表达出G蛋白,并对其进行了生物信息学分析,为蛋白纯化及狂犬病诊断试剂盒的进一步研制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王园园	吉林大学动物医学学院	32	79	5.0	7.0
2	靳朝	吉林大学动物医学学院	21	105	4.0	10.0
3	夏志平	军事医学科学院军事兽医研究所	14	63	4.0	7.0
4	李志萍	军事医学科学院军事兽医研究所	4	13	2.0	3.0
5	董晓琳	军事医学科学院军事兽医研究所	1	1	1.0	1.0
6	孙钰	军事医学科学院军事兽医研究所	1	1	1.0	1.0