基于HER2靶标的抗体偶联药物T-DM1内吞机制研究

• 作者: 刘运龙 张茂桃 白海红 程远国 胡百卉 蔡继锋 车津晶 陈知航 鲁杰
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 抗体偶联药物 T-DM1 人表皮生长因子受体2 表面等离子共振 内吞机制
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 331-334
• 页数: 4页
• 分类号: R96
• 字数: 2976字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2016.03.007

摘要

目的:研究抗体偶联药物T-DM1与乳腺癌细胞SKBR3表面人表皮生长因子受体2(HER2)的相互作用及内吞机制.方法:采用基于表面等离子共振(SPR)原理的Biacore方法测试配体T-DM1与受体HER2的相互作用,通过流式细胞仪测定药物在体外内吞清除率,利用激光扫描共聚焦显微镜原位检测药物在细胞中的内吞过程.结果:T-DM1与HER2具有高亲和力,ka为6.234× 106 mol/(L·s),kd为3.077× 10-4/s,KD为4.936×10-11mol/L,流式细胞实验证明受体与配体的结合具有饱和性;利用免疫荧光方法检测到T-DM1在SKBR3细胞内的消除呈时间-剂量依赖关系,实验表明4h内荧光强度减低32％,48 h时降低约90％;共聚焦显微镜实验表明T-DM1先与SKBR3细胞表面的HER2受体结合,进入细胞内,反应1h到达溶酶体,48 h时在显微镜下已消失.结论:T-DM1与HER2具有高亲和力及结合饱和性,在1 h内通过HER2介导内吞进入细胞,随后定位于溶酶体,最后于48 h裂解.