致人体呼吸道感染的似棘阿米巴形态学和分子生物学鉴定

• 作者: 严继舟 乔岩 彭恒 朱淮民
• 来源期刊: 中国寄生虫学与寄生虫病杂志
• 关键词: 葛氏棘阿米巴 呼吸道 形态鉴定 分子鉴定
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 113-117
• 语种: 中文

摘要

目的 鉴定某反复咳嗽患者痰液样本中形态学似棘阿米巴的寄生虫种属. 方法 分离患者痰液中原虫进行体外培养,显微镜观察原虫滋养体和包囊形态,并提取原虫DNA,采用阿米巴科18SrRNA通用引物Ami6F1和Ami9R、棘阿米巴属18S rRNA通用引物JDP1和JDP2、葛氏棘阿米巴(Acanthamoeba griffini)S-7 ATCC 18S rRNA全长序列引物AacGF和AacGR进行PCR扩增鉴定.以样本的18S rRNA基因为分子标志,与GenBank中各棘阿米巴序列进行同源性分析,筛选相关物种序列,采用最大似然法构建系统进化树,分析亲缘关系. 结果 镜下可见,患者痰样中的滋养体具有棘阿米巴特征性的棘状伪足凸起,并呈无规则的变形虫状;包囊为两层膜结构,内膜具有棘阿米巴特征性的星状突起.PCR检测结果显示,采用3组引物分别扩增出830、479和1 954 bp的条带,与预期片段大小一致.经BLAST比对后,3个扩增产物序列与棘阿米巴S-7 ATCC相似度分别达99％、99％、100％.系统进化树结果显示,样本棘阿米巴与引起角膜炎的卡氏棘阿米巴(A.castellanii)、多噬棘阿米巴(A.polyphaga)、柯氏棘阿米巴(A.cullbertsoni)和条脊棘阿米巴(A.rhysodes)同源性较高,分别为91.4％、99.6％、94.5％和91.8％. 结论 该呼吸道感染患者痰液样本中的寄生虫鉴定为葛氏棘阿米巴.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱淮民	第二军医大学病原生物学教研室	55	261	9.0	12.0
2	彭恒	第二军医大学病原生物学教研室	17	57	5.0	6.0
3	严继舟	上海海洋大学海洋生物和神经科学研究所	10	19	3.0	4.0
4	乔岩	上海海洋大学海洋生物和神经科学研究所	3	7	2.0	2.0