麻风杆菌 PCR 检测方法的优化及应用

• 作者: 叶理 吕成志 宋顺鹏 张振国 王会翔 靳亚丽
• 来源期刊: 皮肤性病诊疗学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 麻风分枝杆菌 聚合酶链反应 实时定量聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 23-26
• 页数: 4页
• 分类号: R755
• 字数: 3242字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-8468.2016.01.006

摘要

目的：研建一种适用于临床中检测麻风杆菌（ ML）的分子生物学方法，并优化检测条件以提高检测方法的灵敏度。方法：用麻风杆菌纯DNA作模板，对PCR反应体系中模板浓度、引物浓度等反应条件进行优化，以建立高敏感性的PCR反应体系，并与实时荧光定量PCR（Real-time PCR）方法比较，对麻风病人标本进行检测，确定优化后两法的反应体系及两法的临床检测意义。结果：经过大量的实验比对表明，反应体系引物含量为0.2μL ×100μmol时，模板浓度10－1条ML／mL可以作为稳定的可检测到条带的模板浓度的下限。对52例各型麻风患者标本的检测结果显示常规 PCR 检测阳性数（49／52）略高于Real-time PCR（47／52），但Real-time PCR操作程序简单和需时短，且成本低。结论：通过对PCR反应条件中DNA模板浓度和引物浓度的优选，提高了PCR检测麻风杆菌DNA的灵敏度；对于不同PCR方法的选择方面， Real-time PCR 比常规 PCR 简捷快速，而常规 PCR 灵敏度略高于 Real-time PCR。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋顺鹏		27	78	5.0	7.0
2	吕成志		20	62	4.0	7.0
3	张振国		25	100	7.0	8.0
4	王会翔		2	9	1.0	2.0
5	叶理		3	11	2.0	3.0
6	靳亚丽		1	1	1.0	1.0