油菜抗菌肽基因BnLTP1的克隆表达及活性

• 作者: 于景印 刘胜毅 曹慧慧 柯涛 童超波 董彩华 黄军艳
• 来源期刊: 中国油料作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 油菜 抗菌肽 转脂蛋白 融合表达 活性检测
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 1-6
• 页数: 6页
• 分类号: S565.403
• 字数: 5105字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7505/j.issn.1007-9084.2016.01.001

摘要

为研究转脂蛋白(lipid transfer protein,LTP)作为抗菌肽在油菜防御反应中的作用,利用生物信息学的方法,从油菜中筛选获得了一个转脂蛋白类抗菌肽基因,命名为BnLTP1.BnLTP1基因长度为93bp,编码31个氨基酸残基.抗菌肽BnLTP1分子量约为3.4kDa,其序列中的4个半胱氨酸形成两个分子内二硫键,对于稳定抗菌肽的结构起到至关重要的作用.通过overlap PCR的方法对该基因进行体外人工合成,并克隆到pET30a/His-EDDIE-GFP表达载体上进行体外原核表达.抑菌活性实验检测发现,BnLTP1对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和酵母菌都有较强的抑菌活性;对植物病原真菌(核盘菌、灰霉菌和稻瘟病菌)等也具有抑菌活性.