家蚕抗菌肽基因的克隆及重组蛋白的自诱导表达

• 作者: 叶青霞 孙艳 尹建华 朱灵明 王丽仙 王靖 谢昆
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 家蚕 抗菌肽 重组蛋白 自诱导表达 纯化
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 页码范围: 33-38
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 字数: 3370字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.2018.01.006

摘要

抗菌肽是生物体内具有抗菌活性的一种小分子物质,在昆虫细胞抵御外源微生物的感染过程中发挥着重要作用.为研究家蚕抗菌肽基因克隆、重组抗菌肽的表达和纯化方法,以家蚕中肠组织总RNA为模板,设计4对特异性引物,应用RT-PCR技术扩增BmCecropin、BmCecropinB6、BmCecropinD和Bmmoricin这4种抗菌肽基因,通过自诱导方式原核表达4种抗菌肽重组蛋白,并对4种抗菌肽重组蛋白进行Ni-NTA亲和层析和超滤纯化.结果表明,克隆的BmCecropin、BmCecropinB6、BmCecropinD和Bmmoricin 这4种抗菌肽的基因大小分别为198,108,105,129 bp,通过自诱导方式表达的BmCecropin、BmCecropinB6、BmCecropinD和Bmmoricin这4种抗菌肽重组蛋白,经SDS-PAGE电泳检测,大小分别为24,21,20,22 ku,经Ni-NTA亲和层析和超滤纯化后的4种抗菌肽重组蛋白条带单一.结果可为4种抗菌肽重组蛋白后续的抑菌试验和在抑菌剂、化妆品和防腐剂等方面的进一步应用奠定基础.