栉江珧和近江牡蛎的精子超低温冷冻保存

• 作者: 于非非 余祥勇 曹静 王梅芳 郑娇
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 栉江珧 近江牡蛎 精子 冷冻保存
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 研究资源与技术改进
• 页码范围: 305-312
• 分类号: Q492
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2016.02.017

摘要

栉江珧(Atrina pectinata)和近江牡蛎(Crassostrea rivularis)是我国重要的海产经济贝类,建立其精子冷冻保存技术及精子冷冻库,对种质资源的保护和遗传育种具有重要意义.本研究对其精子冷冻保存过程中冷冻剂种类和浓度的选择、冷冻程序、平衡时间、保存体积、精液稀释方式、保存时间等多个影响因素进行了比较筛选,并利用显微镜直接检测和曙红Y(eosin Y)染色检测结合的方式检验精子存活率.结果表明,二甲亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)作为抗冻剂的保存效果要明显优于甘油(glycerol,Gly),终浓度为8％～10％的二甲亚砜保存效果最好,其栉江珧和近江牡蛎精子活率均可达60％以上,而甘油保护下精子活率小于40％.精液的稀释方式采用将抗冻液等分为3份,依次与精液混合,每次间隔8 min,整个过程约30 min;此种精液稀释方式与一次性混合方式相比,精子活率可提高约30％.稀释后精液需要在4℃下平衡15～25 min,平衡样品与直接冷冻样品相比,精子活率提高约50％.精液降温程序为在样品投入液氮前,于液氮面以上15 cm处停留5 min,5 cm处停留10 min,精子活率可达60％以上;而未经此降温程序直接投入液氮中的样品精子活率接近0.与此降温程序相对应的样品冷冻体积在1.0～1.4 mL范围内为宜.冷冻180 d内复苏的精子活率由90％左右(鲜精)下降至60％左右,180 d后精子活率下降至56％左右.研究结果为栉江珧和近江牡蛎精子超低温冷冻保存、双壳类种质保护和遗传育种提供了理论和技术依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余祥勇	广东海洋大学水产学院	41	341	11.0	16.0
2	王梅芳	广东海洋大学水产学院	37	270	9.0	14.0
3	于非非	广东海洋大学水产学院	15	88	5.0	9.0
4	郑娇	广东海洋大学水产学院	3	8	2.0	2.0
5	曹静	广东海洋大学水产学院	1	2	1.0	1.0