不同条件下两株溶磷菌溶磷量及葡萄糖脱氢酶基因表达与酶活分析

• 作者: 于亭 刘晶晶 孙合美 杨美英 武志海 王春红
• 来源期刊: 微生物学报
• 关键词: 溶磷菌 溶磷量 葡萄糖脱氢酶 Pseudomonas sp. Enterobacter sp.
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 651-663
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20150297

摘要

[目的]获得大豆根际土壤中溶磷能力较强的菌株,明确在菌株溶磷过程中葡萄糖脱氢酶(GDH)的作用特点及其基因的表达水平.[方法]利用溶磷圈方法分离与纯化溶磷菌株,采用Vitek2系统和16SrRNA序列分析菌株的分类地位;测定2菌株的溶磷量、GDH活性,并根据GDH基因的保守区序列设计引物,克隆GDH基因,利用实时荧光定量PCR测定不同条件下基因的相对表达量.[结果]筛选出2株具有较强溶磷能力的溶磷菌,分别鉴定为Pseudomonas sp.和Enterobacter sp.,2菌株最高溶磷量分别为558 μg/mL和478 μg/mL;成功地克隆了2株溶磷菌的GDH基因,片段大小分别为2007 bp和2066 bp;2菌株在不同磷源、不同pH值培养基中GDH活性及基因表达量不同,菌株wj1在高磷条件下基因表达量最高,磷胁迫条件下基因表达量较低,而wj3在不同磷源条件下GDH基因表达量都较低.且GDH基因表达量及酶活的变化与wj3菌株溶磷量没有直接的关系.[结论]从大豆根际土壤中分离获得溶磷能力较强的菌株Pseudomonas sp.wj1和Enterobacter sp.Wj3,GDH活性及基因表达在2株菌溶磷过程中具有不同的作用特点,2菌株溶磷机制不完全相同.