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摘要:
目的:将重组的葡萄糖脱氢酶基因在大肠杆菌中表达,优化表达条件,以期获得较高活力的葡萄糖脱氢酶.方法:将枯草芽孢杆菌葡萄糖脱氢酶基因与表达载体pET22b连接后转化至大肠杆菌JM109(DE3)进行表达,经对发酵时间、诱导物浓度、诱导时间以及细胞破碎等条件的控制,实现葡萄糖脱氢酶的高表达.结果:重组质粒转化菌发酵2 h后进入对数生长期,诱导剂IPTG浓度为0.5 mmol/L,诱导2.5~3 h后用240 W超声破碎细胞,表达的粗提酶活力比诱导前提高了近千倍.SDS-PAGE电泳显示重组菌能表达单体分子量为31.5KD的特异性蛋白.结论:表达质粒的拷贝数、宿主菌培养条件、细胞破碎方式等均能影响酶的表达量.
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文献信息
篇名 重组葡萄糖脱氢酶基因的表达研究
来源期刊 江苏大学学报(医学版) 学科 医学
关键词 葡萄糖脱氢酶 表达 基因
年,卷(期) 2005,(4) 所属期刊栏目 基础医学
研究方向 页码范围 291-293
页数 3页 分类号 Q75|R394.2
字数 1769字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1671-7783.2005.04.005
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 周丽萍 江苏大学医学技术学院生物化学教研室 33 163 7.0 10.0
2 姜旭淦 江苏大学医学技术学院生物化学教研室 48 252 10.0 14.0
3 徐顺高 江苏大学医学技术学院生物化学教研室 30 301 5.0 17.0
4 郑铁生 江苏大学医学技术学院生物化学教研室 45 250 9.0 13.0
5 王卉放 江苏大学医学技术学院生物化学教研室 14 75 5.0 8.0
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葡萄糖脱氢酶
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江苏大学学报(医学版)
双月刊
1671-7783
32-1669/R
大16开
江苏省镇江市梦溪园巷30号 出版楼5楼
28-192
1991
chi
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