枯草芽孢杆菌葡萄糖脱氢酶的克隆和表达

• 作者: 丁建霞 周丽萍 王卉放 赵燕
• 来源期刊: 江苏大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 枯草芽孢杆菌 葡萄糖脱氢酶 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 7-10
• 页数: 4页
• 分类号: R446.6
• 字数: 1983字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7783.2004.01.003

摘要

目的:运用分子生物学手段获得葡萄糖脱氢酶基因,并表达该基因.方法:根据枯草芽孢杆菌葡萄糖脱氢酶基因序列设计引物,通过PCR获得该基因并与源序列进行比较分析,与表达载体pET22b连接后转化至大肠杆菌JM109(DE3)进行表达,并在全自动生化分析仪上用速率法测定其活性.结果:克隆到的葡萄糖脱氢酶基因与源基因的同源性为99%,克隆到的GDH编码的氨基酸序列167位左右存在突变:EVI(GAAGTGATT)→AF(GCGTTT),利用酶的初提液测定的葡萄糖脱氢酶活力为75 U/L,比活性为10 U/mg.结论:运用基因工程手段获得了葡萄糖脱氢酶基因,与表达载体连接后的重组体经大肠杆菌初步表达有活力,经诱导有望获得高产量的葡萄糖脱氢酶,从而为临床服务.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周丽萍	江苏大学医学技术学院生化教研室	33	163	7.0	10.0
2	丁建霞	江苏大学医学技术学院生化教研室	9	33	2.0	5.0
3	赵燕	江苏大学医学技术学院生化教研室	4	17	3.0	4.0
4	王卉放	江苏大学医学技术学院生化教研室	14	75	5.0	8.0