亮氨酰氨肽酶基因的阻断对刺糖多孢菌生长及次级代谢产物合成的影响

• 作者: 夏立秋 徐妙 杨燕 罗林根
• 来源期刊: 微生物学报
• 关键词: 刺糖多孢菌 亮氨酰氨肽酶基因 阻断 多杀菌素 接合转移
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 629-642
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20150279

摘要

[目的]构建亮氨酰氨肽酶基因(pepA)被阻断的刺糖多孢菌工程菌株,并鉴定该基因对刺糖多孢菌菌丝形态、生物量、菌体全蛋白表达水平及产多杀菌素能力的影响,探究该基因调控多杀菌素合成的可能机制.[方法]利用PCR扩增刺糖多孢菌中的pepA基因同源片段,经酶切连接技术构建敲除载体pOJ260-pepA;通过接合转移和单交换同源重组将该载体整合至刺糖多孢菌染色体中,获得工程菌株S.sp-△pepA;利用培养特征、形态学、高效液相色谱、SDS-PAGE等方法对菌株进行研究分析.[结果]工程菌株S.sp-△pepA菌丝片段化程度加剧,生长态势被延缓且生物量降低,但有效促进了多杀菌素的生物合成.阻断亮氨酰胺肽酶基因的表达使刺糖多孢菌菌体全蛋白表达情况发生明显改变,找到表达水平显著上调的差异蛋白核糖体蛋白亚基和醛基脱氢酶,核糖体蛋白亚基通过影响蛋白质代谢对菌体生长产生影响;醛基脱氢酶则可与乙醇脱氢酶、乙酰辅酶A的合成酶相互作用影响辅酶A合成,而辅酶A是合成多杀菌素的重要底物.[结论]在刺糖多孢菌合成多杀菌素的次级代谢过程中,pepA基因作为负调控因子发挥作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	夏立秋	湖南师范大学生命科学学院	74	526	13.0	19.0
2	杨燕	湖南师范大学生命科学学院	20	424	10.0	20.0
3	罗林根	湖南师范大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
4	徐妙	湖南师范大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0