衰老模型骨髓基质细胞抑制造血细胞增殖分化

• 作者: 宋小英 张岩岩 景鹏伟 王亚平 王璐 胡文煦 贾道勇
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 衰老 造血微环境 骨髓基质细胞 造血细胞,增殖分化
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 12-18
• 页数: 7页
• 分类号: R392.2
• 字数: 4146字
• 语种: 中文

摘要

目的 研究衰老骨髓基质细胞对骨髓造血细胞增殖分化能力的影响,为阐述机体造血微环境衰老对造血干/祖细胞增殖的影响提供实验依据.方法 全骨髓贴壁法体外培养大鼠骨髓基质细胞,分为对照组和衰老组.衰老组:常规培养基内加入30 mg/mL D-半乳糖作用48 h.CCK-8法测定BMSCs增殖;流式细胞术分析细胞周期;β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色观察衰老BMSCs百分率;Western blot检测P16、P21和P53蛋白表达.骨髓造血细胞与BMSCs共培养,集落计数检测髓系多向性造血祖细胞(CFU-Mix)增殖分化.ELISA检测BMSCs培养上清液中IL-1β、GM-CSF和SCF含量;DCFH-DA流式荧光检测BMSC活性氧簇(ROS)水平;酶学法检测BMSCs内过氧化物丙二醛(MDA)含量和总超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果 与对照组相比,D-半乳糖诱导BMSCs衰老,细胞阻滞于G0/G1期(P＜0.01),增殖能力显著下降,SA-β-Gal染色阳性率升高(P＜0.01);衰老相关蛋白P16、P21和P53表达明显上调(P＜0.01).与衰老BMSCs共培养的骨髓造血细胞增殖分化能力减弱.衰老BMSCs内ROS、MDA氧化损伤指标上升,SOD抗氧化指标下降(P＜0.01);BMSCs培养上清液IL-1β、GM-CSF和SCF含量明显下降(P＜0.01).结论 衰老骨髓基质细胞抑制造血细胞增殖、分化能力,其机制可能与骨髓基质细胞氧化损伤,分泌活性因子改变有关.