人巨细胞病毒UL55编码蛋白结合蛋白的筛选与鉴定

• 作者: 刘畅 吉耀华 柳中洋 阮强 马艳萍 黄郁静 齐莹
• 来源期刊: 微生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 人巨细胞病毒 UL55编码蛋白 人胎脑cDNA文库 ENO 1 相互结合
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 68-73
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 字数: 4179字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-7021.2016.05.012

摘要

从人胎脑cDNA文库中筛选和鉴定出与人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV) UL55编码蛋白结合的蛋白.将UL55基因编码区克隆到诱饵载体pGBKT7中,在证实UL55蛋白不具有自激活作用的前提下,采用Match-maker GAL酵母双杂交系统筛选人胎脑cDNA文库中与UL55蛋白结合的宿主蛋白,用酵母双杂交回转实验验证UL55蛋白与获得的蛋白结合的可靠性.将酵母双杂交筛选出的文库蛋白烯醇化酶1(enolase1,ENO 1)构建到pGEX-4T-2载体上,利用GST pull-down技术体外验证ENO 1与HCMV UL55蛋白的结合.并依据所筛选出蛋白的生物学功能分析UL55蛋白可能的生物学功能.结果显示有10种蛋白与HCMV UL55编码蛋白结合.应用GST pull-down技术检测到ENO 1与HCMV UL55相互结合的蛋白条带.成功地筛选出10种与UL55蛋白相互结合的宿主蛋白,GST pull-down实验进一步表明ENO 1可以与HCMV UL55蛋白直接结合,为进一步研究UL55蛋白的功能提供了新的线索.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马艳萍	中国医科大学附属盛京医院病毒室	25	29	3.0	4.0
2	阮强	中国医科大学附属盛京医院病毒室	48	227	7.0	14.0
3	齐莹	中国医科大学附属盛京医院病毒室	32	45	4.0	6.0
4	吉耀华	中国医科大学附属盛京医院病毒室	28	128	7.0	10.0
5	刘畅	中国医科大学附属盛京医院病毒室	74	332	12.0	14.0
6	黄郁静	中国医科大学附属盛京医院病毒室	1	0	0.0	0.0
7	柳中洋	中国医科大学附属盛京医院病毒室	5	3	1.0	1.0