慢病毒载体介导RNA干扰LOX表达对人阴道壁成纤维细胞弹性蛋白、基质金属蛋白酶2表达的影响

• 作者: 张荣 董晓燕 陈信良
• 来源期刊: 同济大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 赖氨酰氧化酶 盆腔器官脱垂 RNAi 慢病毒 弹性蛋白 基质金属蛋白酶-2
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 19-24,30
• 分类号: R711.2
• 字数: 5068字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16118/j.1008-0392.2016.04.004

摘要

目的 探讨人阴道壁成纤维细胞中赖氨酸氧化酶(lysine oxidase,LOX)的表达在盆腔器官脱垂发生中的可能机制.方法 选取绝经前、后无症状对照组的阴道前壁组织,用酶消化+组织块培养法分离培养成纤维细胞,细胞免疫荧光法对细胞进行鉴定.针对LOX基因,设计并构建4个慢病毒干扰载体(LOX-RNAi-LV),分别转染HEK-293T细胞,Real-Time PCR检测LOX的表达情况,筛选出其中1个干扰效率最高的LOX-RNAi-LV,将其包装成慢病毒并测定效价,将慢病毒感染人阴道壁细胞,Real-Time PCR检测细胞中弹性蛋白和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的mRNA表达水平.结果 培养出绝经前、后无症状对照组的阴道前壁成纤维细胞各4例,成功筛选出了具有较高干扰效率的LOX-RNAi-LV并成功包装入慢病毒,感染慢病毒的人阴道前壁成纤维细胞,弹性蛋白表达均降低,MMP-2表达均增高,差异有统计学意义.结论 LOX-RNAi-LV慢病毒感染后的人成纤维细胞弹性蛋白表达降低,MMP-2表达增高,因此推测LOX对弹性蛋白和基质金属蛋白酶2的表达有调节作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈信良	上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院妇科	9	30	3.0	5.0
2	董晓燕	克拉玛依市中心医院妇产科	2	4	1.0	2.0
3	张荣	克拉玛依市中心医院妇产科	1	3	1.0	1.0