《中国药典》中蕲蛇饮片分子鉴定方法的研究和探讨

• 作者: 宋茜 王淑红 王铁杰 苏畅 邵鹏柱 鲁艺 黄家乐
• 来源期刊: 世界科学技术-中医药现代化
• 学科: 医学
• 关键词: 分子鉴定技术 蕲蛇饮片 中国药典 质量标准 16S rRNA
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 专题讨论:DNA条形码技术在中药材及其种源鉴定中的应用
• 页码范围: 196-201
• 页数: 6页
• 分类号: R282.5
• 字数: 3779字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11842/wst.2016.02.009

摘要

目的:运用多种分子鉴定方法,从技术要求和标准编写方面对蕲蛇饮片现行质量标准提出建议.方法:本研究选取蕲蛇所在蝰科Viperidae蝮亚科Crotalinae的7个近缘物种和9种常见的蕲蛇伪品物种作为研究对象,采用DNA条形码技术扩增16S rRNA序列,运用电泳检视法,根据扩增条带的有无评价模板DNA的质量;16S rRNA序列扩增产物通过双向测序,运用BioEdit软件拼接,双端对齐后剪切比对,利用MEGA 5.1软件构建邻接(NJ)系统发育树;采用蕲蛇饮片现行标准方法进行同步鉴别.结果:16SrRNA序列的电泳检视结果可有效评价蕲蛇样品的模板DNA质量,避免由于模板DNA质量不佳导致的假阴性结果的可能性;基于16S rRNA条形码序列建立的NJ树可以鉴别蕲蛇饮片及其混淆品;蕲蛇饮片现行标准方法专属性良好.结论:DNA条形码方法、现行标准方法以及NJ树三者相互结合,从不同角度对蕲蛇饮片进行真伪鉴别,有效弥补蕲蛇饮片现行标准方法的不足,为其他中药品种的分子鉴定技术的质量标准制定提供了参考.