三疣梭子蟹细胞周期蛋白H基因克隆及其在卵巢发育中的表达分析

• 作者: 刘萍 孟宪亮 宋娜 李健 贾复龙 高保全 高天翔
• 来源期刊: 中国海洋大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 三疣梭子蟹 cyclin H 基因克隆 去眼柄 基因表达 卵巢
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 62-69
• 页数: 8页
• 分类号: Q953.1|S917.4
• 字数: 5703字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16441/j.cnki.hdxb.20150365

摘要

Cyclin H作为细胞周期调控活动中的关键因子,通过与相应的细胞周期蛋白依赖性激酶(Cdks)结合来调控细胞周期中的各个环节,而三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)卵巢发育过程中存在旺盛细胞分裂活动的阶段,关于其卵巢发育的分子机制研究依旧较少.本实验通过SMART RACE方法,获得三疣梭子蟹cyclinH基因cDNA序列全长.并通过实时荧光定量PCR对其进行三疣梭子蟹卵巢发育相关的表达分析.结果发现,基因全长1 077 bp,开放阅读框(ORF)、5’及3,非编码区(UTR)长度分别为999、31和46 bp.预测编码一个包含332个氨基酸,分子量、等电点分别为38.89和6.20 kDa的蛋白质,蛋白序列包含一个周期蛋白盒保守结构域.同源分析表明,三疣梭子蟹Cyclin H蛋白序列其他甲壳动物有着较高的同源性,与拟穴青蟹(Scylla paramamosain)和斑节对虾(Penaeus monodon)的同源性分别为95 ％和80％.表达分析后结果显示,cyclinH基因在卵巢中的表达量最高且在Ⅰ期和Ⅱ期卵巢中的表达量显著高于其他卵巢发育时期,去眼柄后该基因在卵巢中的表达量于第4天达到最大值且显著高于对照组,呈现先升高后降低的趋势(P＜0.05).研究结果为深入开展三疣梭子蟹和其他甲壳动物性腺发育调控研究提供了重要信息.