白木香2个小分子热激蛋白基因的克隆及表达分析

• 作者: 刘晓 史社坡 屠鹏飞 张乐 张钟秀 王娟 王晓晖 董先娟
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 白木香 sHSP1基因 sHSP2基因 表达分析 热激蛋白 生物信息学
• 年，卷（期）: 2016,（22）
• 所属期刊栏目: 药材与资源
• 页码范围: 4054-4061
• 分类号: R282.12
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.22.021

摘要

目的 从白木香Aquilaria sinensis中克隆sHSP1和sHSP2基因,并对它们的生物信息学及表达模式进行分析.方法 根据本课题组白木香转录组数据库进行分析获得2条具有小分子热激蛋白(sHSPs)保守结构域的sHSPs基因序列,利用RT-PCR技术克隆sHSP1和sHSP2基因的全长cDNA序列,并对其进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR检测sHSP1和sHSP2基因在不同组织和高盐及外源ABA、SA、MJ处理下不同时间的表达差异.结果 克隆得到的白木香sHSP1和sHSP2基因开放阅读框都为474 bp,编码157个氨基酸.组织表达分析的结果显示,sHSP1和sHSP2基因主要在根中表达,在茎和叶中的表达量较少;白木香愈伤组织在高盐处理下,sHSP1和sHSP2基因分别在36 h和24h达到最高表达水平,而愈伤组织在外源ABA、MJ处理下,sHSP1和sHSP2基因都在12 h达到最高表达水平,在SA处理下,sHSP1和sHSP2基因分别在12、24 h达到最高表达水平.结论 获得了sHSP1和sHSP2 2基因全长cDNA序列,且2个基因在不同组织根、茎、叶中的表达存在差异性,在受到高盐和外源ABA、SA、MJ处理时,在不同时间的愈伤组织中的表达及积累情况也不同,该研究为后续深入研究白木香防御反应奠定了基础.