摘要:
目的 探讨小檗碱对皮肤黑素瘤A375细胞株增殖及细胞周期相关miRNA及其靶基因表达的影响.方法 体外培养A375细胞,加入不同浓度小檗碱(0,20,40,60,80,100μmol/L),用噻唑蓝(MTT)法测定小檗碱对A375细胞生长的抑制作用;流式细胞实验检测细胞周期;实时定量RT-PCR法检测小檗碱对A375细胞miRNA-34a,miRNA-154,miRNA-26a,miRNA-124及其对应靶基因CDK4,CyclinD1,Cy-clinE,CDK2表达的影响.采用SPSS13.0软件进行多因素方差分析.结果 MTT法结果显示小檗碱抑制A375细胞增殖,具有时效依赖性和量效依赖性(P<0.05).流式细胞实验表明低浓度(20,40μmol/L)小檗碱作用后细胞周期呈S期阻滞和G2/M期阻滞(均P<0.05),高浓度(60,80μ.mol/L)小檗碱作用后细胞周期呈G2/M期阻滞(P<0.05).实时定量RT-PCR结果表明,小檗碱作用后随着浓度的增加miRNA-34a,miRNA-154,miRNA-26a,miRNA-124表达增加(均P<0.05),其对应的靶基因CDK4,CyclinD1,CyclinE,CDK2表达减弱(均P<0.05).结论 小檗碱对A375细胞的生长抑制作用呈时间和浓度依赖性;小檗碱可能通过调控细胞周期相关miRNA及其靶基因对黑素瘤A375细胞发挥抑制作用.