沉默ERK增强A375黑素瘤细胞对TRAIL诱导细胞凋亡的敏感性

• 作者: 刘庆平 张帆 李坤 李红霞 秦建中
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 黑素瘤 A375细胞 细胞外信号调节激酶 TRAIL 细胞凋亡 糖代谢
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 343-349
• 分类号: R739.5|R730.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2016.03.008

摘要

目的:探讨直接抑制细胞外信号调节激酶(extra cellular signal-regulated kinase,ERK)表达后,对肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TNF related apoptosis inducing ligand,TRAIL)对黑素瘤细胞杀伤作用的影响及其作用机制.方法:用携带ERK特异或对照shRNA的慢病毒感染A375黑素瘤细胞,48 h后加入终浓度为100 μg/ml基因重组TRAIL蛋白继续培养6h,收获细胞,碘化丙啶染色,用流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡和TRAIL受体的表达;Western blotting检测相关蛋白的表达水平.结果:亚型特异的ERK shRNA分别沉默ERK1或ERK2,导致A375细胞出现G1期阻滞(对照shRNA组的G1期细胞比例为71％,ERK1、ERK2、ERK1 +2 shRNA组分别增加到85％、90％和81％,P＜0.01);S期细胞从对照组的11％减少到2％左右(P＜0.001)、G2/M期细胞也从对照组的17％减少到3％(P＜0.01).细胞周期改变伴有P21、P27蛋白上调和Cyclin D1蛋白降低,但未见明显的细胞凋亡.经对照shRNA和TRAIL处理的细胞,仅有15％的凋亡率,而ERK shRNA和TRAIL联合处理则使凋亡率达到40％ ～60％ (P＜0.01).抑制ERK蛋白表达能显著上调细胞表面TRAIL受体DR4的表达(从对照组32％增加到75％～80％,P＜0.01),但DR5变化不明显.ERK抑制还明显降低A375细胞的葡萄糖转运受体1(Glut 1)和己糖激酶Ⅱ(HK-Ⅱ)的蛋白表达水平.结论:直接抑制ERK不仅可以抑制肿瘤细胞周期的进展,而且可以增强TRAIL对A375黑素瘤细胞的杀伤作用,其机制与上调细胞表面DR4的表达和干扰肿瘤细胞糖代谢有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李坤	大连大学生命科学与技术学院辽宁省糖脂代谢重点实验室	48	216	7.0	13.0
2	张帆	大连大学生命科学与技术学院辽宁省糖脂代谢重点实验室	19	36	3.0	5.0
3	刘庆平	大连大学生命科学与技术学院辽宁省糖脂代谢重点实验室	38	130	7.0	10.0
4	李红霞	大连大学生命科学与技术学院辽宁省糖脂代谢重点实验室	3	2	1.0	1.0
5	秦建中	大连大学生命科学与技术学院辽宁省糖脂代谢重点实验室	7	7	2.0	2.0