DMAS联合PERK抑制剂对人NSCLC PC9/GR细胞凋亡的作用研究

• 作者: 余玉 阮善明 陈喆
• 来源期刊: 实用肿瘤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 癌,非小细胞肺/药物疗法 紫草/治疗应用 细胞凋亡 内质网 应激 蛋白激酶类
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 29-34
• 分类号: R734.2|R730.53
• 语种: 中文

摘要

目的 观察β,β'-二甲基丙烯酰紫草素(β,β'-dimethylacryl shikonin,DMAS)联合PKR样ER激酶(PKR-like ER kinase,PERK)抑制剂协同促吉非替尼耐药的人非小细胞肺癌PC9/GR细胞凋亡的作用效应,并探讨其分子机制.方法 DMAS单独作用PC9/GR细胞,CCK-8法检测细胞增殖活力,Western blot法检测葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)、C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)及未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)相关信号通路中蛋白的变化.PERK抑制剂GSK2606414干预后,Annexin-V-PI流式细胞术检测细胞凋亡率的变化,Western blot法检测caspase-3、caspase-8、caspase-9及多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)剪切活化水平的变化.结果 DMAS呈浓度依赖性(0、5、10、15 μmol/L)抑制PC9/GR细胞的增殖活力(P＜0.05).DMAS呈浓度依赖性诱导PC9/GR细胞凋亡及caspase-3、caspase-8、caspase-9及PARP的剪切活化水平(均P＜0.05);内质网应激标志蛋白GRP78、CHOP蛋白水平呈时间依赖性(0、2、4、8小时)上调(均P＜0.05),PERK和真核起始因子2(eukaryotic initiation fac-tor-2α,eIF2α)磷酸化水平及其下游的信号分子活化转录因子4(activating transcription factor4,ATF4)表达水平增加(均P ＜0.05),但其他UPR相关的蛋白:肌醇需酶1α(inositol-requiring enzyme 1α,IRE1α)、剪接型X盒结合蛋白1(X-box binding protein 1 spliced,XBP1s)、ATF6未见明显变化(均P＞0.05).与DMAS或GSK2606414单一作用组比较,二者联合作用组细胞凋亡增加(P＜0.05),PERK磷酸化水平降低(P＜0.05),凋亡相关蛋白caspase-3、caspase-8、caspase-9及PARP的剪切活化水平增加(均P＜0.05).结论 PERK-eIF2α信号通路在DMAS诱导人非小细胞肺癌PC9/GR凋亡中起保护作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	阮善明	浙江省中医院肿瘤科	48	314	11.0	15.0
2	陈喆	浙江省中医院中心实验室	7	19	3.0	4.0
3	余玉	浙江中医药大学第一临床医学院	1	4	1.0	1.0