五株猪流行性腹泻病毒的分离鉴定及序列分析

• 作者: 于萍萍 刘明明 吴珊珊 孟萌 满坤 王贵华 赵亚荣
• 来源期刊: 中国兽药杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 猪流行性腹泻病毒 分离鉴定 序列分析
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: 微生物与免疫
• 页码范围: 13-19
• 页数: 7页
• 分类号: S852.65
• 字数: 5421字
• 语种: 中文

摘要

为研究猪流行性腹泻病毒的流行情况并分析该病毒的培养特性，对甘肃、北京、河北、山西、浙江五个猪场送检的疑似猪流行性腹泻病猪小肠内容物，用 RT －PCR 方法进行检测，证明为猪流行性腹泻病毒核酸阳性。然后将阳性病料进行传代培养、病毒含量测定以及特异性检验，证明获得五株猪流行性腹泻病毒，分别命名为 Ningxia9、Beijing5、Gaocheng8、Shanxi1、Zhejiang08。对分离的毒株进行 S 基因全长测序及氨基酸序列分析。结果表明：五株分离毒株在盲传19代开始出现明显的细胞病变，盲传到24代，出现稳定的细胞病变且五株分离毒株的24代病毒含量在104．5～5．0 TCID50／mL 之间；用 S 蛋白进行进化树分析表明，五株分离毒株与近年来国内流行毒株亲缘关系很近，在同一个进化分支上；分离的五株野毒株之间的氨基酸同源性高达99．2％～99．9％，而这五株野毒与 GenBank 上提交的2011年、2012年分离的野毒株的之间的氨基酸同源性为98．4％～99．9％；实验室分离毒株及国内近年流行毒株均与国内外经典毒株存在一定的共性，即特定位置氨基酸的插入、缺失或置换。