嵌合抗原受体修饰的NK-92MI细胞对HER2阳性乳腺癌细胞的杀伤

• 作者: 孔潇 孟会敏 安钢力 朱学军 李甲璐 杨林 游凤涛 秦扬 袁磊
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乳腺癌细胞 NK-92MI细胞 HER2嵌合抗原受体(HER2-CAR)
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 620-625
• 分类号: R730.51|R737.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2016.05.006

摘要

目的:探讨用特异性靶向HER2抗原的嵌合抗原受体(HER2-CAR)修饰的NK-92MI细胞对HER2阳性乳腺癌细胞的杀伤效率.方法:通过PCR获得HER2-CAR片段,运用常规分子克隆技术,将其构建到慢病毒载体上,利用包装的慢病毒颗粒对NK-92MI细胞进行转染;应用流式细胞术检测细胞转染效率以及转染前后NK-92MI的IFN-γ和颗粒酶分泌差异;使用7-AAD和流式细胞术体外检测HER2-CAR-NK92MI细胞对乳腺癌细胞的杀伤效率;构建小鼠乳腺癌原位肿瘤模型进行体内细胞毒性的检测.结果:用HER2-CAR修饰的NK-92MI细胞对HER2阳性乳腺癌肿瘤细胞MCF-7和T47D的杀伤效率明显高于未被基因修饰的NK-92MI细胞[分别为(62.4±1.3)％ vs (22.1±1.2)％和(50.0±1.9)％vs(16.9±0.6)％,P＜0.01];而两者对HER2阴性的乳腺癌细胞MDA-MB-468的杀伤效率没有明显差异[(13.6±1.4)％vs(12.7±0.8)％,P＞0.05].同时,经HER2-CAR修饰的NK-92MI细胞相比未被基因修饰的NK-92MI细胞,IFN-γ的分泌明显升高(P＜0.01).结论:经HER2-CAR修饰的NK-92MI细胞对HER2阳性乳腺癌细胞的杀伤效率明显提高,且具有特异性靶向,此为治疗乳腺癌等恶性肿瘤提供了临床依据.