邻苯二甲酸单乙基己基酯对神经干细胞增殖和迁移的作用

• 作者: 刘劲 廖双菊 林函 梅虹霞 苏颖 郑丽丹 郝欣蕊 马晓晓 黄意湘
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 邻苯二甲酸单乙基己基酯 神经干细胞 NE-4C 细胞增殖 细胞迁移 糖皮质激素受体
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 545-552
• 页数: 8页
• 分类号: R114
• 字数: 5084字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2016.05.010

摘要

目的：探讨邻苯二甲酸单乙基己基酯（MEHP）对原代神经干细胞（NSC）和NE-4C小鼠细胞增殖和迁移的影响。方法原代NSC来源于孕15 d（E15）远交群SD胎大鼠脑皮质；NE-4C细胞为小鼠NSC。MEHP 0，1，10，100和1000μmol·L-1处理72 h后，CCK-8法检测细胞活力；5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷（EdU）法检测细胞增殖能力；Transwell小室检测细胞迁移；Western蛋白印迹法检测糖皮质激素受体（GR）、Y性别决定区框2（Sox2）、信号传导与转录激活因子3（Stat3）等基因及蛋白的表达。结果 CCK-8结果显示，与正常对照组相比，MEHP1000μmol·L-1作用72 h后，NE-4C和NSC细胞活力明显减弱，分别为正常对照组的70.3%和40.0%。EdU结果显示，与正常对照组相比，MEHP 100μmol·L-1组细胞增殖率降低，分别为正常对照组的74.8%和12.0%（P<0.05）。Transwell实验发现，MEHP 100μmol·L-1处理72 h后， NE-4C细胞的迁移率降低至（63.4±2.0）%（P<0.05）。MEHP 100μmol·L-1组NE-4C中与增殖和迁移相关的基因GR，Stat3和Sox2的表达下调，分别为正常对照组的49.8%，26.0%和14.0%（P<0.05）；在NSC中的相应基因也下调，分别为正常对照组的10.0%，14.0%和15.3%；在NE-4C中与增殖及迁移相关的蛋白GR，GRβ， p-Stat3和Sox2的表达下调，相对表达量分别为0.92±0.17，0.87±0.35，0.62±0.24和0.81±0.22（P<0.05）；在NSC中相应蛋白表达也下调，相对表达量分别为0.82±0.20，0.56±0.12，0.53±0.20和0.84±0.36（P<0.05）。结论大剂量MEHP可抑制NSC的增殖和迁移能力，其机制可能是通过GR介导的Stat3及Sox2的作用实现。