角蛋白18磷酸化增加结肠癌HCT116细胞自噬并提高其对奥沙利铂的敏感性

• 作者: 冦卜心 朱振宇 柴杰 石英 郭洪亮 闫晓东 陈德喜
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结肠肿瘤 奥沙利铂 HCT116细胞 角蛋白18 磷酸化 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 34-38,43
• 分类号: Q279|R735.3|R392-33|Q255
• 语种: 中文

摘要

目的 研究奥沙利铂(OXA)作用下角蛋白18(K18)磷酸化与结肠癌HCT116细胞自噬和凋亡的关系并分析其可能机制.方法 HCT116细胞分别转染空载质粒、野生型K18和33、52磷酸化位点突变的K18质粒(Ser33/52A),用60 μmol/L的OXA处理细胞,加入自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)或细胞自噬诱导剂雷帕霉素处理细胞.异硫氰酸荧光素标记的膜联素V/碘化丙啶(annexinV-F1TC/PI)双标记结合流式细胞术以及钙黄绿素乙酰甲酯/碘化丙啶(calcein-AM/PI)染色法分析K18及其突变体对细胞凋亡的影响;Western blot法检测K18的磷酸化水平、自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、beclin-1的表达.结果 Ser33/52A质粒的转染可以明显降低K18的磷酸化水平,经过OXA处理后,转染K18质粒组的HCT116细胞的凋亡率显著高于空载质粒转染对照组,而Ser33/52A质粒转染的HCT116细胞的凋亡率明显低于空载体和K18质粒转染的细胞凋亡率,K18质粒转染组细胞自噬明显高于空载转染对照组,而Ser33/52A质粒转染组自噬水平明显降低.结论 K18过表达促进HCT116细胞自噬及其对OXA的敏感性,而K18 Ser33和Ser52磷酸化水平的降低则抑制自噬并降低HCT116细胞的凋亡率.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈德喜	首都医科大学附属北京佑安医院感染科	154	453	11.0	13.0
2	石英	首都医科大学附属北京佑安医院感染科	51	149	6.0	9.0
3	郭洪亮	山东省肿瘤医院外科四病区	20	75	5.0	7.0
4	冦卜心	首都医科大学附属北京佑安医院感染科	1	1	1.0	1.0