大型成年哺乳类动物绵羊阴道平滑肌细胞的原代培养改进方法研究

• 作者: 于翠革 刘晓英 姜向阳 张璐 李玢 李连香
• 来源期刊: 中国计划生育和妇产科
• 学科: 医学
• 关键词: 盆腔器官脱垂 阴道平滑肌细胞 原代培养 动物模型
• 年，卷（期）: 2016,（9）
• 所属期刊栏目: 论著与临床
• 页码范围: 63-66,71
• 页数: 5页
• 分类号: R329.33
• 字数: 4097字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-4020.2016.09.17

摘要

目的：探索原代培养成年大型哺乳动物绵羊阴道平滑肌细胞( vaginal smooth muscle cells, VSMC)改良方法。方法成年绵羊阴道平滑肌取材,利用预消化组织块法(将组织剪碎呈1 mm3大小组织块,0．1%Ⅰ型胶原酶消化20 min,0．1%胰酶-EDTA与0．1%Ⅰ型胶原酶混合溶液再次消化30 min,将组织块种于培养瓶)原代培养 VSMC,并与传统组织块法和酶消化法进行细胞萌出速度及增殖速度比较,提高VSMC原代培养效率；免疫荧光染色法和western bloting法检测平滑肌细胞标志物calponin及a-SMA表达鉴定VSMC。结果预消化组织块法获得原代VSMC速度快于传统组织块法和酶消化法,3 d可见细胞萌出,9 d可达80%细胞融合,“峰谷”特征明显,而酶消化法至12 d增殖至80%细胞汇合,传统组织块法约7 d可见细胞萌出,14 d可达80%细胞汇合；VSMC 平滑肌标志物 calponin 和 a -SMA 均呈阳性表达( P <0．05)；VSMC可扩增代数有限,扩增7代后即表现出细胞形态改变,增殖缓慢,胞核内出现空泡,死亡细胞增加等表现。结论预消化组织块法可较快速多量获得绵羊VSMC。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于翠革	陕西省人民医院妇科	22	109	8.0	9.0
2	姜向阳	陕西省人民医院妇科	23	63	4.0	6.0
3	李连香	陕西省人民医院妇科	17	64	4.0	7.0
4	李玢	陕西省人民医院妇科	22	47	3.0	5.0
5	刘晓英	陕西省人民医院妇科	11	47	4.0	6.0
6	张璐	陕西省人民医院妇科	2	2	1.0	1.0