肌酐水解酶基因工程菌的构建及功能研究

• 作者: 向铁勇 朱艳 杨成 杨波 段绍斌 蒋云生 蒋芬
• 来源期刊: 中南医学科学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肌酐水解酶 基因工程菌 肌酐 慢性肾功能衰竭
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: .基础医学.
• 页码范围: 494-498
• 页数: 5页
• 分类号: R692.5
• 字数: 4109字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15972/j.cnki.43-1509/r.2016.05.004

摘要

目的：构建肌酐水解酶的重组质粒转染至大肠杆菌中,研究其蛋白的表达及活性。方法根据Genbank上肌酐水解酶基因序列( D45424.1),进行生物合成,得到肌酐水解酶基因片段C,聚合酶链反应( PCR)扩增后,与质粒GV296连接,构建成重组质粒GV296￣C,转染至大肠杆菌BL21(DE3),构建成基因工程菌GV296￣C/BL21( DE3)。进行十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺( SDS￣PAGE)分析后,测定培养液肌酐浓度变化。结果成功构建重组质粒GV296￣C,电泳显示目的片段约为0.783Kb,测序结果与D45424.1基因序列一致。重组质粒GV296￣C转染至E.coli BL21(DE3)感受态细胞中,经SDS￣PAGE分析酶蛋白的分子量约为29KD。结论成功构建工程菌GV296￣C/BL21( DE3),诱导后高效表达肌酐水解酶,具有水解肌酐活性。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨波	南华大学附属第一医院肾内科	38	140	6.0	9.0
2	蒋芬	南华大学附属第一医院肾内科	6	7	2.0	2.0
3	朱艳	南华大学附属第一医院肾内科	4	27	2.0	4.0
4	杨成	长沙医学院临床系	3	5	2.0	2.0
5	向铁勇	湖南省衡阳市第八中学生物教研室	5	2	1.0	1.0
6	段绍斌	湘雅二医院肾内科	3	9	2.0	3.0
7	蒋云生	湘雅二医院肾内科	6	18	3.0	4.0