Cyclophilin D在氧化应激下人视网膜色素上皮细胞中的表达

• 作者: 任媛 何媛 刘旭 刘瀛 张纯涛 王霞
• 来源期刊: 眼科新进展
• 关键词: 氧化应激 Cyclophilin D 视网膜色素上皮细胞 环孢素A
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 501-505
• 页数: 5页
• 字数: 4447字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13389/j.cnki.rao.2016.0134

摘要

目的 检测氧化应激下人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞内Cyclophilin D的表达,初步探索RPE细胞氧化损伤保护新靶点.方法 培养细胞系ARPE19及人原代RPE细胞,相差显微镜下观察细胞形态,应用激光共聚焦显微镜免疫荧光法鉴定细胞.不同浓度H2O2(0μmol·L-1、100 μmol·L-、500μmol·L-1、1 mmol·L-1)处理细胞24 h后,应用RT-PCR检测Cyclophilin D在细胞内的表达.随后预先在部分细胞中加入3μmol·L-1环孢素A(cyclosporin A,CsA)处理30 min后再加入不同浓度H2O2(80 μmol·L-1、160 μmol·L-1、320μmo·L-1)2h,即CsA+H2O2组,应用乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)法检测细胞致死率,并与H2O2组的LDH释放量相比较.结果 培养的ARPE19和人原代RPE细胞均表达RPE细胞特异性抗体RPE65.100 μmol·L-1H2O2处理细胞24h后Cyclophilin D表达量明显升高,当H2O2浓度增加到500 μmol·L-1时,Cyclophilin D表达量降低,1 mmol·L-1 H2O2处理时,Cyclophilin D表达水平未见增加.在各H2O2组组间,LDH的释放量随着H2O2浓度的升高而增加;与H2O2组相比,CsA+H2O2组LDH的释放水平明显降低(P＜0.05).结论 氧化应激下RPE细胞内Cyclophilin D的表达升高,该蛋白表达的增加可能进一步导致氧化应激下细胞的死亡,CsA可能成为RPE细胞保护的新策略.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张纯涛	西安医学院第二附属医院眼科	9	7	2.0	2.0
2	何媛	西安医学院第二附属医院眼科	29	111	5.0	9.0
3	王霞	西安医学院第二附属医院眼科	12	43	3.0	6.0
4	刘瀛	西安医学院第二附属医院眼科	3	16	2.0	3.0
5	任媛	西安医学院第二附属医院眼科	2	2	1.0	1.0
6	刘旭	西安医学院第二附属医院眼科	7	26	2.0	5.0