摘要:
目的 研究应用小干扰RNA沉默S100A4蛋白后对人胃腺癌细胞BGC-823增殖、凋亡及化疗敏感性的影响.方法 人胃腺癌BGC-823细胞系转染siRNA,RT-PCR检测转染效果后将对数期胃腺癌细胞分为干扰组、阴性对照组、正常对照组,MTT检测不同浓度奥沙利铂对胃腺癌细胞中效浓度IC50值;绘制细胞生长曲线;TUNEL法检测细胞凋亡;RT-PCR检测各组细胞mRNA变化;Western blot检测蛋白水平的变化,计量资料选用t检验,SPSS17.0分析RT-PCR检测各组细胞mRNA的变化,Western blot检测蛋白水平的变化,细胞生长曲线描述细胞增殖,TUNEL法检测细胞凋亡,MTT法检测不同浓度奥沙利铂对胃腺癌细胞中效浓度IC50值.计量资料以((x)±s)表示,多个样本比较采用单因素方差分析和LSD检验方法.P<0.05为差异有统计学意义.结果 RT-PCR结果显示BGC-823细胞转染S100A4siRNA 48 h后,S100A4mRNA的表达量分别为:(0.674±0.011)、(0.652±0.021)、(0.345±0.040),正常对照组与干扰组相比差异有统计学意义(P =0.012,P<0.05),阴性对照组与干扰组差异均有统计学意义(P =0.000,P<0.05),正常对照组与阴性对照组差异无统计学意义(P =0.380,P>0.05);Western blot结果显示BGC-823细胞转染S100A4 48 h后表达量明显下调分别为:(0.654±0.025)、(0.642 +0.014)、(0.317 +0.061),正常对照组与干扰组相比差异有统计学意义(P=0.01,P<0.05),阴性对照组与干扰组差异均有统计学意义(P=0.000,P<0.05),正常对照组与阴性对照组无统计学差异(P =0.341,P>0.05).S100A4siRNA转染后人胃腺癌BGC-823细胞增殖下降;TUNEL法结果显示转染后凋亡明显增加;MTT结果表明人胃腺癌BGC-823单用奥沙利铂中效浓度IC50分别为56.31 μmol/L,转染后奥沙利铂中效浓度IC50为0.654 μmol/L.结论 本研究结果表明,siRNA沉默S100A4蛋白后抑制胃腺癌细胞增殖、诱导凋亡并提高奥沙利铂化疗敏感性,提示S100A4可能是治疗胃腺癌的有效靶点.