聚乙烯亚胺介导miR-2861模拟物转染MC3T3-E1细胞的体外成骨分化

• 作者: 刘杰 孙宏晨 宫海环 布文奂 方滕姣子 董悦 顾中一
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: miRNA-2861模拟物 聚乙烯亚胺 MC3T3-E1细胞系 成骨分化 基因治疗
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 848-854
• 页数: 7页
• 分类号: R336
• 字数: 5575字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13481/j.1671-587x.20160502

摘要

目的：通过非病毒载体聚乙烯亚胺（PEI）介导 miRNA-2861（miR-2861）模拟物转染 MC3T3-E1细胞系，探讨 miR-2861／PEI 复合物在前成骨细胞中的转染效率及其对细胞增殖和成骨向分化的影响。方法：将适量的 PEI 分别与 miR-2861和阴性对照（NC）以元素 N／P ＝10的比例混合形成基因／载体复合物。将miR-2861／ PEI复合物作为实验组，NC／PEI 复合物作为阴性对照组以排除人工合成的双链基因对成骨作用的干扰。采用 MTT 法筛选 PEI 复合 miR-2861模拟物的最佳使用浓度；应用荧光成像和茎环法 RT-PCR 技术分别检测10、30、50和100 nmol·L－1 miR／PEI 复合物对 MC3T3细胞的瞬时转染效率和 miR-2861的表达情况；采用qRT-PCR 技术和茜素红染色检测用选定浓度瞬时转染 miR-2861／PEI 复合物作用下 MC3T3细胞的成骨能力。结果：与空白对照组比较，100 nmol·L－1 miR-2861／PEI 复合物作用72 h 时 MC3T3细胞增殖率明显下降（P ＜0.05）。随转染浓度增加，miR-2861／PEI 复合物在 MC3T3细胞中的转染效率逐渐升高。茜素红染色及定量分析，实验组诱导21 d 后出现较多的钙盐沉积结节，而空白对照组和阴性对照组均较少。结论：以 PEI 作为载体可使 miR-2861模拟物有效转染 MC3T3-E1细胞并在细胞中高表达，miR-2861模拟物具有一定的促 MC3T3-E1细胞成骨向分化的作用。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘杰	吉林大学口腔医院病理科	71	2039	13.0	45.0
2	宫海环	吉林大学口腔医院病理科	28	39	3.0	4.0
3	方滕姣子	吉林大学口腔医院病理科	18	21	3.0	4.0
4	孙宏晨	吉林大学口腔医院病理科	194	754	13.0	16.0
5	顾中一	吉林大学口腔医院病理科	6	13	2.0	3.0
6	布文奂	吉林大学口腔医院病理科	9	22	2.0	4.0
7	董悦	吉林大学口腔医院病理科	2	4	1.0	2.0