非病毒载体介导pBMP-2转染MC3T3-E1细胞的体外成骨分化研究

• 作者: 吕凯歌 张富强 徐玲
• 来源期刊: 口腔颌面外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 非病毒载体 聚乙烯亚胺 MC3T3-E1细胞 骨形态发生蛋白2 成骨分化
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 179-184
• 页数: 6页
• 分类号: R782
• 字数: 4438字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4979.2015.03.004

摘要

目的：探讨非病毒载体GenEscortTM II介导质粒骨形态发生蛋白2（pBMP-2）转染对MC3T3-E1细胞增殖和体外成骨分化的影响。方法：以非病毒载体GenEscortTM II介导报告基因质粒增强型绿色荧光蛋白（pEGFP）转染MC3T3-E1细胞，优化转染条件，荧光显微镜和流式细胞仪评价转染效率。 pBMP-2转染MC3T3-E1细胞后，MTT法检测细胞增殖情况，染色法检测碱性磷酸酶（ALP）和茜素红S（ARS）的表达，Real-time PCR 分析成骨细胞标志基因ALP、骨涎蛋白（BSP）、Runt 相关转录因子2（Runx2）、骨钙素（OCN）和骨桥蛋白（OPN）的表达。结果： GenEscortTM II介导pEGFP转染MC3T3-E1细胞后，转染效率达35.02±4.42，MTT结果示基因转染对细胞增殖无影响（P>0.05）。pBMP-2转染组的ALP、ARS表达较pEGFP转染组和未转染组显著，同时Real-time PCR检测结果示，转染后6 d， pEGFP转染组和未转染组相比，pBMP-2转染组的成骨基因ALP、BSP、Runx2、OCN、OPN的表达量差异有显著性意义(P<0.05)。结论：非病毒载体GenEscortTM II介导BMP-2转染MC3T3-E1细胞可诱导其向成骨方向分化。