SCN5A基因L812Q突变体细胞模型的建立与细胞定位

• 作者: 倪磊 刘利英 汪鲁敏 王爱英 许德晖
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: Brugada综合征 SCN5A基因 基因突变 细胞定位
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 585-588
• 页数: 4页
• 分类号: R596.1
• 字数: 3417字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13753/j.issn.1007-6611.2016.07.001

摘要

目的 建立SCN5A基因L812Q突变体细胞模型,并细胞定位. 方法 应用重叠PCR的方法构建SCN5A基因L812Q突变;以pMD19-T载体克隆SCN5A基因L812Q突变体;SCN5A-L812Q通过EcoR Ⅰ和ACC Ⅰ限制性内切酶位点插入表达载体质粒pEGFP-C1-hH1中,测序鉴定;将构建好的pEGFP-C1-hH1-L812Q突变型质粒、pEGFP-C1-hH1野生型质粒瞬时转染进入HEK293细胞,通过免疫荧光检测L812Q突变的细胞定位;将pEGFP-C1-hH1、pEGFP-C1-hH1-L812Q和pEGFP-C1-hH+ pEGFP-C1-hH1-L812Q分别转染进入HEK293细胞,用Western blot方法分析L812Q突变体的表达. 结果 测序结果显示pEGFP-C1-hH1-L812Q表达载体构建成功.荧光检测验证,野生型SCN5A主要定位在细胞膜上,而突变型定位在细胞质中.通过Western blot分析发现,突变型通道蛋白在细胞质中的表达量高于野生型. 结论 本研究成功构建了SCN5A基因突变载体pEGFP-C1-hH1-L812Q,证明SCN5A基因L812Q突变型主要定位在细胞质中.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘利英	西安交通大学医学部环境与疾病相关基因教育部重点实验室细胞生物学与遗传学系	8	50	3.0	7.0
2	倪磊	西安交通大学医学部环境与疾病相关基因教育部重点实验室细胞生物学与遗传学系	18	160	6.0	12.0
3	王爱英	西安交通大学医学部环境与疾病相关基因教育部重点实验室细胞生物学与遗传学系	8	27	4.0	4.0
4	许德晖	西安交通大学医学部环境与疾病相关基因教育部重点实验室细胞生物学与遗传学系	4	2	1.0	1.0