电穿孔法转染水牛脂肪干细胞与成纤维细胞的研究

• 作者: 杨素芳 石德顺 邓彦飞 陈凤 陈自洪 黄贵婷
• 来源期刊: 中国畜牧杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 水牛 电穿孔法 细胞相对存活率 转染效率
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 60-65
• 页数: 6页
• 分类号: S823.5
• 字数: 4872字
• 语种: 中文

摘要

本研究以不同培养代数(P)水牛脂肪干细胞(buffalo adipose-derived stem cells,BASC)和成纤维细胞(buffalo fetal fibroblasts,BFFs)为研究对象,采用电穿孔法对其进行转染,比较转染后细胞的相对存活率和转染效率,为生产高效转基因供体细胞奠定基础.以绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因,电转染48 h后观察荧光表达,收集细胞采用血细胞计数法和流式细胞仪分析细胞相对存活率和转染效率.结果表明:电转后的BASC和BFF表达EGFP,BASC相对存活率低于BFF,P10之前BFF存活率更稳定;BASC和BFF转染效率随培养代数增加出现不同程度的降低,P10之前BFF转染效率更稳定.电转技术可用于转染BASC和BFF,并获得较高的转染效率;使用体外培养早期代数的BASC(P8之前)和BFF(P10之前)可以获得更稳定转染效率的转基因细胞.