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摘要:
目的 采用电穿孔方法,介导质粒载体pEGFP-c1转入兔成体成纤维细胞,探讨建立电穿孔介导外源基因转染兔成体成纤维细胞的基本条件.方法 电穿孔介导质粒载体pEGFP-c1转入7-10代兔耳成体成纤维细胞系GG,研究不同电压、电容、DNA剂量,孵育温度的条件下,观察细胞存活数,流式细胞仪测试GFP的含量.结果 以PBS作为电击基础液、细胞浓度2×106个/ml,电压250 V、电容700 μF,DNA用量30 μg时,兔耳成纤维细胞的转染率和存活率最佳.且电击前冰浴10 min,电转染后37℃孵育10 min有利于提高细胞的转染率和存活率.结论 在合适电压、电容、DNA剂量条件下,电转染提供了外源基因转染兔耳成体成纤维细胞适用性;电转染前的一定时间冰浴和电转染后一定温度孵育可使电转染效率得到改善.
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内容分析
关键词云
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文献信息
篇名 电穿孔介导外源基因转染兔成体成纤维细胞的初步研究
来源期刊 实验动物与比较医学 学科 生物学
关键词 电穿孔 兔成体成纤维细胞 pEGFP-c1 转染
年,卷(期) 2010,(4) 所属期刊栏目
研究方向 页码范围 241-245,250
页数 分类号 Q95-33
字数 4124字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1674-5817.2010.04.002
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研究主题发展历程
节点文献
电穿孔
兔成体成纤维细胞
pEGFP-c1
转染
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
实验动物与比较医学
双月刊
1674-5817
31-1954/Q
16开
上海浦东金科路3577号
4-789
1981
chi
出版文献量(篇)
2226
总下载数(次)
11
总被引数(次)
7271
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
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