脂质体介导抗乙脑病毒载体转染猪胎儿成纤维细胞条件的优化

• 作者: 周婧 唐元凤 宋学雄 张文平 张莉平 曲洪磊 李方正
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 抗乙脑病毒载体 猪胎儿成纤维细胞 脂质体 转染
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 调查研究
• 页码范围: 9-11,14,中插1
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65+9.6
• 语种: 中文

摘要

本试验旨在探索脂质体Lipofectamine TM2000介导抗猪乙脑病毒(Anti-JEV)载体转染猪胎儿成纤维细胞(PFF)的最适条件,为构建Anti-JEV转基因胚胎提供供核细胞.从妊娠大白母猪获取10～15 cm猪胎儿,采集背部皮肤用于组织块法培养分离PFF.结果显示,细胞培养至P7代,生长曲线正常；P5-7代细胞用于抗猪乙脑病毒载体转染,当质粒DNA量设定为0.35、0.7、1.05 μg和1.4 μg时,转染率分别为12.75％、36.82％、24.12％和8.85％；当脂质体量设定为0.7、1.4、2.1、2.8 μL和3.5 μL时,转染率分别为13.08％、21.71％、37.15％、24.21％和9.21％；当转染时间设定为2.5、4.5、6.5h和8.5h时,转染率分别为3.97％、38.48％、17.54％和12.47％.这些结果表明,2.1μL脂质体介导0.7 μg质粒DNA转染4.5h转染效率最高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李方正	青岛农业大学动物科技学院	30	147	7.0	11.0
2	宋学雄	青岛农业大学动物科技学院	26	43	4.0	5.0
3	曲洪磊	青岛农业大学动物科技学院	4	1	1.0	1.0
4	张莉平	青岛农业大学动物科技学院	4	0	0.0	0.0
5	周婧	青岛农业大学动物科技学院	6	3	1.0	1.0
6	唐元凤	青岛农业大学动物科技学院	3	1	1.0	1.0
7	张文平	青岛农业大学动物科技学院	4	8	2.0	2.0