CHIR99021对小鼠胚胎干细胞心肌细胞分化的双重作用

• 作者: 杨谋广 王爱玲 邹传德
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 胚胎干细胞 心肌细胞 分化 GSK3β CHIR99021
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 1733-1737
• 页数: 5页
• 分类号: R329.2
• 字数: 4523字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2016.12.004

摘要

目的：研究CHIR99021在小鼠胚胎干细胞( mESCs)分化为心肌细胞的作用。方法运用经典的悬滴培养法促进 mESCs 形成拟胚体( EBs)。在不同分化时间段加入糖原合成激酶-3β(GSK-3β)抑制剂CHIR99021,诱导mESCs向心肌细胞分化,相差显微镜在不同时间点观察不同组EBs搏动百分率。 RT-PCR法检测心肌特异性转录因子Nkx2．5、α-肌球蛋白重链(α-MHC)基因表达水平的变化。 Western blot法和免疫荧光染色法检测心肌特异性蛋白cTnT的表达。实验时将不加入CHIR99021命名为对照组,分化第2~5天和第6~10天加入CHIR99021分别命名为2~5 d组和6~10 d组。结果通过悬滴培养法能够形成 EBs,且形成的EBs能够出现自发性搏动并有cTnT表达。在诱导分化的过程中,第2~5天加入CHIR99021的2~5 d组的搏动 EBs百分率比对照组更高,Nkx2．5、α-MHC基因表达的水平也比对照组高；6~10 d组的结果跟2~5 d组相反。各组中都可通过Western blot和免疫荧光染色法检测到cTnT的表达,但2~5 d组的cTnT的表达量高于对照组,6~10 d组的cTnT的表达量低于对照组。结论 GSK-3β抑制剂 CHIR99021对mESCs心肌细胞分化具有双重作用,即分化前期(2~5 d)促进分化,可获得更高的分化率,分化后期(6~10 d)结果相反。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王爱玲	安徽医科大学第一附属医院心血管内科	76	389	11.0	14.0
2	杨谋广	安徽医科大学第一附属医院心血管内科	3	2	1.0	1.0
3	邹传德	安徽医科大学第一附属医院心血管内科	4	8	2.0	2.0