CHIR99021和Wnt3a在小鼠胚胎干细胞向心肌细胞分化中的作用

• 作者: 杨谋广 王爱玲 邹传德
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: CHIR99021 Wnt3a 小鼠胚胎干细胞 心肌细胞
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 73-78
• 页数: 6页
• 分类号: R349.7
• 字数: 4205字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2017.01.015

摘要

目的 观察Wnt/β-catenin信号通路激活剂CHIR99021和Wnt3a在小鼠胚胎干细胞(mESCs)向心肌细胞分化中的作用.方法 采用悬浮一步培养法形成拟胚体(EBs),在EBs形成后第2天至第5天分别加入CHIR99021、Wnt3a,命名为CHIR99021组及Wnt3a组,将自动分化的EBs作为对照组.用免疫荧光法检测心肌特异性蛋白肌球蛋白重链(α-MHC)、肌钙蛋白T(cTNT)及膜联蛋白43(CX43)的表达.用qRT-PCR检测中胚层标志基因Brachyury、心肌前体细胞标志基因Nkx2.5、心肌细胞特异性标志基因α-MHC、cTnT和Cx43 mRNA的表达.用Western blot法检测 α-MHC、cTNT和CX43蛋白表达.结果 免疫荧光法提示各组mESCs能够向心肌细胞分化.在CHIR99021和Wnt3a诱导分化过程中,Brachyury在分化第7天达高峰;Nkx2.5、α-MHC、cTnT和Cx43的mRNA表达量随着分化时间的延长而逐渐增加,第15天增加最为明显,且CHIR99021组和Wnt3a组高于对照组;CHIR99021组优于Wnt3a组(P<0.05,P<0.01).Western blot检测结果显示CHIR99021组和Wnt3a组α-MHC、cTNT和CX43蛋白表达量明显高于对照组,CHIR99021组高于Wnt3a组.结论 CHIR99021和Wnt3a在分化早期阶段通过活化Wnt/β-catenin信号通路可促进mESCs心肌细胞分化,且CHIR99021促心肌分化作用优于Wnt3a.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王爱玲	安徽医科大学第一附属医院心血管内科	76	389	11.0	14.0
2	杨谋广	安徽医科大学第一附属医院心血管内科	3	2	1.0	1.0
3	邹传德	安徽医科大学第一附属医院心血管内科	4	8	2.0	2.0