Toll样受体4抑制剂TAK-242对Aβ25-35诱导PC12细胞毒性损伤的保护作用

• 作者: 刘艳芝 刘莹 林永忠 王前 王淳 葛宇松 马成永
• 来源期刊: 中华神经医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Toll样受体4 TAK-242 髓样分化因子88 β淀粉样蛋白25-35片段
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1206-1211
• 页数: 6页
• 分类号: R742
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2016.12.004

摘要

目的 探讨Toll样受体4(TLR4)抑制剂TAK-242在β淀粉样蛋白25-35片段(Aβ25-35)诱导PC12细胞毒性损伤中的保护作用及机制. 方法 利用CCK-8法检测不同浓度Aβ25-35(0、10、20、30 μmol/L)作用PC12细胞24 h后的细胞存活率,以确定构建阿尔茨海默病(AD)细胞模型的Aβ25-35浓度,同时进一步检测TAK-242预处理1h后该Aβ25-35浓度下的细胞存活率.将PC12细胞分为4组:正常对照组、Aβ处理组、TAK-242预处理组和TAK-242对照组.采用Hoechst33258染色检测各组细胞凋亡情况,采用酶联免疫反应吸附试验(ELISA)检测各组细胞培养基上清液中白介素-lβ(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平,采用Western blotting检测各组细胞TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、IκB激酶复合体(IKKα/β)和核因子-κB(NF-κB)表达水平. 结果 20 μmol/L Aβ25-35作用PC12细胞24 h后的细胞存活率约为0 mol/L Aβ25-35组的50％,因此采用此浓度Aβ25-35构建AD细胞模型;并且经TAK-242预处理后,其细胞存活率较20 μmol/L Aβ25-35组显著升高,差异有统计学意义(P＜0.05).Hoechst 33258染色显示TAK-242预处理组凋亡细胞较Aβ处理组明显减少.ELISA检测显示:与正常对照组相比,Aβ处理组IL-1β、TNF-α表达量明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05);与Aβ处理组相比,TAK-242预处理组Ⅱ-1β、TNF-α表达量明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).Western blotting检测显示:与正常对照组相比,Aβ处理组TLR4、MyD88、IKKα/β和NF-κB蛋白相对表达量明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);与Aβ处理组相比,TAK-242预处理组TLR4、MyD88、iiKo/β和NF-κB蛋白相对表达量显著降低,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 Aβ25-35可通过上调TLR4/MyD88信号通路蛋白表达,增加IL-1β、TNF-α释放,引起PC12细胞存活率下降,诱导细胞凋亡;TAK-242能通过负调控TLR4/MyD88信号通路,最终减少炎性因子Ⅱ-1β、TNF-α分泌,抵抗Aβ25-35诱导的PC12细胞毒性作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	葛宇松	大连医科大学附属第二医院神经内科	8	34	4.0	5.0
2	刘莹	大连医科大学附属第二医院神经内科	50	165	8.0	12.0
3	王淳	大连医科大学附属第二医院神经内科	4	9	2.0	3.0
4	林永忠	大连医科大学附属第二医院神经内科	26	143	7.0	11.0
5	马成永	大连医科大学附属第二医院神经内科	4	8	2.0	2.0
6	王前	大连医科大学附属第二医院神经内科	2	12	2.0	2.0
7	刘艳芝	大连医科大学附属第二医院神经内科	1	6	1.0	1.0