ABCA1基因启动子区VNTR-ZNF和-14nt位点变异对HepG2细胞中基因转录活性的影响

• 作者: 张莹 毛用敏 赵莉莉 高慎霞
• 来源期刊: 中华医学遗传学杂志
• 关键词: 腺苷三磷酸结合盒转运体A1 荧光素酶 转录活性
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 临床遗传学论著
• 页码范围: 633-636
• 页数: 4页
• 字数: 3220字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1003-9406.2016.05.011

摘要

目的：通过体外报告基因实验观察腺苷三磷酸结合盒转运体 A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)基因启动子区 VNTR-ZNF 位点和-14nt 位点变异对转录活性的影响。方法采用基因重组技术将含ABCA1启动子区域 VNTR-ZNF 位点 ACCCC 插入型或缺失型 DNA 片段和同时含VNTR-ZNF 位点插入/缺失变异与-14ntC 或 T 等位基因的 DNA 片段分别插入携带荧光素酶报告基因的表达载体 PGL2,构建重组质粒。以重组质粒转染 HepG2细胞后培养48 h,收集并裂解细胞,测定细胞液中荧光素酶活性,观察和分析启动子部位 VNTR-ZNF 和-14nt 位点的序列变异对于转录活性的影响。结果成功构建了 ABCA1基因启动子 VNTR-ZNF 单一位点表达载体(PGL2-ZNF-ACCCCDel、PGL2-ZNF-ACCCCIns)及 VNTR-ZNF 和-14nt 双位点表达载体(PGL2-ZNFDel-14C、PGL2-ZNFDel-14T、PGL2-ZNFIns-14C 和 PGL2-ZNFIns-14T)。报告基因表达结果显示：经转染 HepG2细胞培养48 h,单一位点表达载体 PGL2-ZNF-ACCCCDel 荧光素酶活性明显高于 PGL2-ZNF-ACCCCIns,双位点表达载体中 PGL2-ZNFDel-14C 重组质粒荧光素酶活性明显高于 PGL2-ZNFIns-14C、PGL2-ZNFDel-14T、PGL2-ZNFIns-14T。结论 ABCA1基因启动子区域 VNTR-ZNF 位点 ACCCC 缺失型等位基因可明显增强ABCA1的转录活性,-14nt C 等位基因与 VNTR-ZNF 缺失型等位基因具有协同作用,使ABCA1的转录活性进一步加强。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	毛用敏		23	80	6.0	7.0
2	张莹		4	13	2.0	3.0
3	赵莉莉		2	9	1.0	2.0
4	高慎霞	天津市胸科医院检验科	2	0	0.0	0.0