猪传染性胃肠炎病毒重组N蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立

• 作者: 何孔旺 俞正玉 倪艳秀 姜平 孙冰 徐向伟 李彬 范宝超 郭容利
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 猪传染性胃肠炎病毒 N基因 克隆 原核表达 间接ELISA
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 31-38
• 页数: 8页
• 分类号: S852.65
• 字数: 6340字
• 语种: 中文

摘要

为建立一种检测猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)血清抗体的间接ELISA方法,将TGEV的N基因片段克隆到pET-28a载体中,转化至大肠杆菌BL21感受态细胞中进行诱导表达,并对表达的蛋白进行Western-blot鉴定.以纯化的重组N蛋白作为包被抗原,最终建立了检测TGEV抗体的间接ELISA方法.该ELISA方法与猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸系统综合征病毒(PRRSV)、口蹄疫病毒(FMDV)、猪圆环病毒2型(PCV2)等5种病毒阳性血清不发生交叉反应,表明建立的ELISA方法具有良好的特异性.本研究可为猪传染性胃肠炎的流行病学调查、诊断与防控奠定基础.