hTERT基因修饰神经干细胞移植修复大鼠脊髓损伤

• 作者: 吴巧萍 周铁丽 李情操 王峰 秦玲
• 来源期刊: 医学研究杂志
• 学科: 医学
• 关键词: hTERT基因 神经干细胞 干细胞移植 大鼠 脊髓损伤
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 99-104
• 页数: 6页
• 分类号: R3
• 字数: 4209字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11969/j.issn.1673-548X.2016.02.026

摘要

目的 对神经干细胞的生物学特性进行观察,探讨hTERT基因修饰神经干细胞移植对修复大鼠脊髓损伤的影响.方法 体外培养的大鼠神经干细胞,用病毒PLXSN为载体介导hTERT基因反转录转染神经干细胞,分为阴性转染组、对照组与hTERT转染组3个组.经Western blot法检测分析hTERT蛋白的表达.运用细胞生长曲线、CCK-8比色法两种方法,分析细胞生长的优化作用.将造模成功的72只大鼠随机分为hTERT-NSCs、NSCs与对照组3组,每组各分24只,通过改良的Allen打击法来建立大鼠急性脊髓损伤模型.通过斜板试验,BBB评分给各组大鼠进行运动功能检测.通过HE染色及荧光显微镜研究,PKH-26标记的分布情况及NSC存活取材进行病理切片.术后72h通过RT-PCR分析脊髓损伤区周围MMP9/2、AQP/9基因的表达,运用UNEL法分析细胞凋亡情况.荧光显微镜观察PKH-26标记的分布情况及NSCs存活.结果 hTERT基因转染大鼠神经干细胞后,hTERT基因转染组蛋白水平有高表达、细胞的生长速度出现明显增快,相比与阴性hTERT转染组与对照组,各组间差异有统计学意义(P＜0.05).对照组的细胞凋亡指数略低于阴性转染组,阴性转染组略低于hTERT转染组大鼠下肢运动功能评价.与对照组相比hTERT转染组AQP4/9基因表达均较显著降低.PKH-26标记的阳性细胞数:对照组最少,hTERT转染组最多,阴性hTERT转染组次之,各组差异有统计学意义(P＜0.05).结论 通过PLXSN病毒为载体介导hTERT基因逆转染神经干细胞,可以促进大鼠神经干细胞增殖.hTERT基因修饰神经干细胞移植可促进脊髓损伤大鼠神经突触的再生,降低脊髓损伤区周围AQP/9、神经细胞凋亡和MMP9/2基因的表达,且能够促进大鼠的电生理及肢体运动功能的恢复.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴巧萍	宁波市医疗中心李惠利医院检验科	15	64	4.0	7.0
2	王峰	宁波市医疗中心李惠利医院检验科	23	55	5.0	5.0
3	周铁丽	温州医科大学第一附属医院检验科	54	195	7.0	10.0
4	李情操	宁波市医疗中心李惠利医院检验科	20	46	4.0	6.0
5	秦玲		4	10	3.0	3.0