miR-204对TFAM的靶向调控作用及其对乳腺癌细胞生长与增殖的影响

• 作者: 罗汉传 肖顺崇 覃俊仕
• 来源期刊: 中国普通外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乳腺肿瘤 微RNAs 高迁移率族蛋白质类 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1615-1621
• 分类号: R737.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.3978/j.issn.1005-6947.2016.11.016

摘要

目的:探讨乳腺癌细胞中miR-204对线粒体转录因子A(TFAM)的靶向调控作用及其与细胞生长、增殖的关系.方法:将人乳腺癌MDA-MB-231细胞分别转染miR-204模拟物或miR-204抑制物,用real-time PCR和Western blot分别检测miR-204与TFAM蛋白的表达;构建荧光酶报告基因质粒(mut-TFAM/wt-TFAM),将其与miR-204模拟物或miR-204抑制物共转染MDA-MB-231细胞后检测荧光酶活性变化;构建pcDNA3.1/TFAM质粒,将其单独或与miR-204模拟物共转染MDA-MB-231细胞后检测TFAM蛋白表达,并用MTT法和BrdU法检测细胞生长与增殖情况.结果:MDA-MB-231细胞转染miR-204模拟物后miR-204的表达明显升高,而TFAM蛋白表达明显降低,转染miR-204抑制物后则呈反向变化(均P＜0.05).wt-TFAM与miR-204模拟物共转染时荧光酶活性明显下降,与miR-204抑制物共转染时荧光酶活性明显升高(均P＜0.05).转染pcDNA3.1/TFAM后,MDA-MB-231细胞的TFAM mRNA及蛋白表达量明显上调,细胞生长与增殖能力明显升高(均P＜0.05);miR-204模拟物后,MDA-MB-231细胞在TFAM表达降低的同时,细胞生长与增殖能力明显降低,而与pcDNA3.1/TFAM共转染后其上述作用均被部分抵消(均P＜0.05).结论:miR-204能靶向抑制乳腺癌细胞TFAM的表达,从而抑制乳腺癌细胞的生长与增殖.